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熒光測試方法


熒光在時域上主要分為穩態熒光測試和瞬態熒光測試兩大類。
 

穩態測試是用連續光源激發樣品,樣品分子不斷吸收能夠從基態躍遷至激發態,再由激發態返回基態,在此過程以發光形式釋放能量,產生熒光。
 

由于光源的不斷激勵,所以放光過程是連續的、穩定的,被稱為穩態光譜;通過光譜的位置、形狀我們可以分析樣品的內部結構、能級分布、甚至結構是否存在缺陷。
 

穩態光譜,又可以分為激發光譜、發射光譜、同步光譜、三維光譜等。
 

(1)激發光譜:發光材料在不同波長光的激發下,該材料的某一發光譜線與譜帶的強度或發光效率與激發光波長的關系。
 

(2)發射光譜:發光材料在某一激發光的激發下,其不同波長的發光強度的強弱變化。
 

(3)同步光譜:發射波長與激發波長保持固定的間隔同時掃描,用于獲取樣品不同的吸收與發射峰相對位置。
 

(4)三維光譜:以不同的激發波長激勵樣品,掃描樣品的發射光譜,其結果可以直接反映樣品被不同波長的激發光激發下的熒光發光特性。
 

瞬態熒光是用脈沖光源激發樣品,樣品分子被瞬時光源從基態激發至激發態,在激發態的分子由于弛豫時間不同(在激發態的停留時間不同),在不同時刻返回基態,同樣的返回基態時會以光的形式釋放能量,通過獲取不同時刻的發光信息,得到的時域光譜就是樣品的衰減曲線,也即是瞬態光譜,再通過對衰減曲線的擬合,得到樣品分子的壽命。
 

瞬態光譜,可以分為衰減曲線,時間分辨光譜等。
 

(5)衰減曲線:用確定波長的脈沖光源激勵樣品,獲取樣品特征波長的熒光衰減曲線,再經過擬合,得到樣品的額壽命。
 

(6)時間分辨光譜:用確定波長的脈沖光源激勵樣品,獲取樣品在其發光波段內的熒光衰減曲線,通過時間切份、強度積分得到不同時間段的時間分辨光譜。
 

以穩態、瞬態熒光為基礎,配合不同的外部實驗環境和方法,比如低溫臺、壓力裝置、磁體,可以得到不同溫度下、壓力下、磁場下的熒光光譜;如果配合顯微光路,通過選擇適合的光路、物鏡,可以得到樣品表面分辨率高達1μm的顯微光譜或影像。