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基于微流控技術的表面增強拉曼在細胞檢測領域的應用
引言：
表面增強拉曼光譜（Surface-enhanced Raman Spectroscopy， SERS）是指當一些分子被吸附到某些粗糙的金屬表面上時，由于樣品表面或近表面的電磁場的增強導致吸附分子的拉曼散射信號比普通拉曼散射(NRS) 信號大大增強的現象，現已被證明是一種快捷高效的光譜學檢測方法。SERS具有較高的檢測靈敏度，極易適用于弱信號樣品的檢測，但在實際應用中，SERS技術的重復性和檢測限一直難以兩全。因此，SERS技術的重復性與靈敏度一直是科學研究的重點。
研究成果：
近日，由西安電子科技大學生命科學技術學院的胡波課題組提出了一種基于軟管微流控的動態流體SERS平臺，有效解決了目前SERS檢測中存在的問題，并將其成功應用于乳腺癌細胞的檢測與分類，該平臺有望成為液體環境中無標記細胞檢測的強大工具，并且在細胞學研究、臨床診斷和食品安全等方面具有廣闊的應用前景。
傳統的測試方法與微流控技術的優劣勢對比：
傳統的SERS測量方法有兩種：靜態固相及靜態液相兩種方法。靜態固相SERS檢測由于分析物與納米顆粒在基底上難以實現均勻混合分布，往往在同一次檢測中難以獲得強度均一的光譜信號。而靜態液相雖然可以在一定程度上解決分析物與納米顆粒在空間尺度上的均勻分散問題，但是由于液體處于靜止狀態，存在混合時間不確定、不規則散射、局部加熱和光離解等問題，因此很難保證光譜重現性。此外，這兩種方法還都需要預混合、干燥等預處理步驟，以及混合時間長等缺點。
微流控技術作為快速處理小體積流體的一種技術，當和SERS技術聯用組成微流控-SERS系統時，能夠實現動態流動條件下的SERS光譜的連續采集，在提高SERS檢測重復性的同時也增加了檢測效率。
然而傳統的微流控芯片加工制備需要造價高昂的潔凈室，且過程耗時耗力。其他無需潔凈室的微流控芯片加工方法仍需昂貴且專業的儀器，加工精度在一定程度上受到限制。西安電子科技大學團隊采用商用、生物相容、透明的微軟管嵌入3D打印支撐模板中組成的軟管微流控SERS平臺，能夠動態地混合溶液、精確地控制混合時間并且能夠用于SERS光譜的連續采集。
與傳統靜態固相和靜態液相測量方法相比，動態流體SERS平臺通過對模型分子的表征，分別以1.90%和4.98%的相對標準偏差展現了良好的穩定性和重復性。
此外，利用該平臺采集三種乳腺細胞的拉曼光譜：正常(MCF-)10A)乳腺細胞及輕度惡性腫瘤(MCF-7)惡性(MDA-MB-231)乳腺癌細胞3例獨立的實驗，并結合K近鄰(K-NN)算法的分類鑒定，實現了靈敏度在83.3%以上，特異性在91.6%以上，準確度為94.4%的無標記細胞檢測。
基于軟管微流控的動態流體SERS平臺具有加工成本低、制作方法簡單等優勢，豐富了微流控芯片的加工制備技術。而且可在短時間內采集大量連續流體的SERS光譜，具有快速、通用、靈敏、可靠、低成本和不需要預處理的優點。該平臺有望成為液體環境中無標記細胞檢測的強大工具，并且在細胞學研究、臨床診斷和食品安全等方面具有廣闊的應用前景。
這一成果近期發表在Analytical Chemistry 上，該文章是西安電子科技大學胡波課題組完成，文章的第一作者是西安電子科技大學碩士研究生續小丁和博士后趙磊。文章鏈接：https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.9b01111
本研究采用的是北京卓立漢光儀器有限公司“Finder One”微區激光拉曼光譜系統，如需了解該產品，歡迎咨詢我司。
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